石蜡切片制作

发布 2019-08-07 18:47:35 阅读 5382

6.固定蜡块:将纸盒拆去,用刀片将有几个组织样的大蜡块修成只带一个组织样的四方小蜡块。将木块有槽的一面滴上少许蜡,迅速粘住蜡块,粘牢后松手,蜡块制作完成。

7.切片:将蜡块上下两面修成平行面,固定于切片机上,与切片刀调成平行,摇动把手,切成蜡带,选择有完整组织样的蜡带使用。

8.贴片:将蜡带光滑面向下,小心放入40~60℃水浴箱中展片。用预先用蛋白甘油处理过的载玻片从水中捞出,使组织样整齐排列在载玻片上,磨沙边上作标记,烘干。

9.脱蜡:将载玻片逐一放入卧式染缸中,倒入二甲苯ⅰ(5min)→二甲苯ⅱ(10min)。

10.复水:脱好蜡的切片→无水乙醇ⅰ(2min)→无水乙醇ⅱ(2min)→95%乙醇(3min)→80%乙醇(3min)→70%乙醇(3min)→晾干→自来水冲洗6次(水柱打在磨沙边上,以免掉片)→蒸馏水(2min)。

11.染细胞核:将苏木**倒入染缸(10~20min,37℃烘箱)→自来水冲去浮色(10sec~1min)→0.

5~1%盐酸酒精分化(20s),肉眼见结缔组织无色即可→自来水“兰化”(15~30min)→镜检(细胞核呈兰紫色,细胞质呈灰色)→蒸馏水(1~2min)。

12.染细胞质:伊红染液(5min)→自来水冲洗浮色(1次),多次会脱色。

13.脱水:70%乙醇(30s)→80%乙醇(30s)→镜检→95%乙醇(2min)→无水乙醇ⅰ(2min)→无水乙醇ⅱ(2min)。

14.透明:二甲苯ⅰ(2~5min)→二甲苯ⅱ(5min)。

15.封固:透明好的切片晾干后,滴适量中性树胶,将盖玻片从一侧慢慢放下。晾干后,用刀片刮去多余的树胶,切片的制作全部完成。

石蜡切片制作方法

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